بررسی کمی تغییرات متیلاسیون پروموتر ژن p15ink4b متعاقب بیان پروتئین ns1 پاروو ویروس b19 در سلولهای پیش ساز اریتروئیدی

پایان نامه
چکیده

پاروو ویروسb19 عامل بحرانهای آپلازی اریتروئیدی ، بیماری پنجم و سقط جنین در سه-ماهه اول بارداری می باشد. اخیرا شواهدی مبنی بر دخالت ویروس در بیماریهایی همچون آرتریت روماتوئید، میوکاردیت حاد و از کارافتادگی حاد کبد ارائه شده است. همچنین طیفی از مطالعات بالینی رابطه همبستگی بین عفونت حاد پاروو ویروسb19 در بیماران، با وقوع لوسمی حاد در آنان را نشان داده اند؛ ولی در سطح سلولی و ملکولی پژوهشی پیرامون بررسی این رابطه انجام نگرفته است. در این مطالعه به ارزیابی اثر ژن ns1 پاروو ویروسb19 بر تغییرات متیلاسیون پروموتر ژنp15ink4b که مهمترین ژن درگیر در انواع لوسمی های حاد می باشد، پرداخته شده است. به این منظور ژن ns1 در وکتور لنتی ویروسی lego-ig2 کلون شده و پس از تولید لنتی ویروس حامل، ژنns1 به سلولهای پیش ساز اریتروئیدی حاصل تمایز سلولهای cd34+ منتقل گردید. پس از اطمینان از بیان ژنns1 و پس از گذشت 72 ساعت؛ dna، rna و پروتئین از سلولهای گروه دریافت کننده ژنns1 و کنترل استخراج گردید. آزمونmsp کمی جهت ارزیابی تغییرات متیلاسیون ژنp15ink4b و آزمون rt-pcr کمی به منظور سنجش بیان ژن p15ink4b، سایر ژنهای مهارکننده کینازهای وابسته به سیکلین و ژنهای p53 و rb انجام گرفت. همچنین وضعیت سیکل سلولی مورد آنالیز قرار گرفته و برای بررسی آپوپتوز از آزمونهای سنجش annexin v و caspase-3 استفاده گردید. نتایج حاصل از بررسی ها نشان داد که ژنns1 اثری بر متیلاسیون ژنp15ink4b و نیز سطح متیلاسیون کلی ژنوم ندارد و نیز تغییر معناداری در بیان ژنp15ink4b ایجاد نمی نماید. بیان ژنهای cdkn1a، cdkn1b و cdkn1c به ترتیب 8/2، 2/4 و 9/18 برابر افزایش یافت و توقف سیکل سلولی در فاز g2 و آپوپتوز در سلولهای مورد آزمایش مشاهده گردید. بر پایه نتایج بدست آمده، ns1 یک القا کننده قوی آپوپتوز می باشد و مطالعات بعدی در این زمینه باید بر روی بررسی اثر سایر ژنهای پاروو ویروسb19 بر سلول میزبان ویروس معطوف شود.

منابع مشابه

بررسی تغییرات متیلاسیون پروموتر ژن her2 در سرطان پستان

سرطان پستان، شایع ترین سرطان در بین زنان و دومین عامل مرگ و میر بعد از سرطان ریه می باشد. این سرطان 32% کل سرطان های زنان را تشکیل می دهد. در کنار تغییرات ژنتیکی متعدد شناخته شده، تغییرات اپی ژنتیکی متعددی کشف شده اند که در فرایند تومورزایی در بافت پستان دخیلند و به تغییر پایدار در الگوی بیان ژن ها در سلول ها منجر و باعث ایجاد و پیشرفت بدخیمی می شوند. پروتوانکوژن her2 پروتئینی را رمزگذاری می کن...

15 صفحه اول

تغییرات متیلاسیون ژن sdf-1 متعاقب تاثیر ایزوپروترنول در سلولهای بنیادی مزانشیمال انسانی در شرایط آزمایشگاهی

زمینه و هدف: یک مسیر حیاتی که در لانه گزینی و حفظ و نگهداری سلول های بنیادی خونساز در داخل مغزاستخوان نقش دارد، اتصال sdf-1/cxcr4 است که در بدن sdf-1 یک ماده جاذب شیمیایی قوی برای سلول های cd34+cd38- مغزاستخوان از جمله سلول های بنیادی خونساز بیان کننده cxcr4، است. sdf-1 به طور وسیعی توسط اندوتلیوم مغزاستخوان انسان، سلول های رتیکولار، سلول های استئوبلاست اندوستئال و سلول های بنیادی مزانشیمی بیان...

15 صفحه اول

بررسی الگوی متیلاسیون پروموتر ژن PRSS8 در مبتلایان به کارسینومای سلول‌های سنگ‌فرشی مری

Background and Objective: Esophageal cancer is the seventh cause of cancer deaths in the worldwide. Epigenetic changes including methylation of genes promoter can play an important role in the pathogenesis of esophageal squamous cell (ESCC). The aim of this investigation was to determine the PRSS8 gene methylation pattern in patients with ESCC. Materials and Methods: This case-control study wa...

متن کامل

بررسی اثر سولفورموستارد بر وضعیت متیلاسیون پروموتر ژن FOXP3 در جانبازان شیمیایی با عوارض تأخیری ریوی

Background and Objective: Sulfur mustard (SM) is a toxic and chemical agent. The incidence of pulmonary complications and inflammatory processes play an important role in SM-exposed individuals. FOXP3 is one of the important factors in the development of chronic pulmonary diseases. FOXP3 gene promoter due to exposure to chemical and toxic materials leads to chronic pulmonary disease. In this st...

متن کامل

تاثیر داروی زولدرونیک اسید در بیان و متیلاسیون ژن BSP در طول تمایز استئوبلاستیک سلولهای بنیادی مزانشیمی

Background and Aim: Bone sialoprotein (BSP) is a specific marker of osteoblastic differentiation. In this research, the effect of Zoledronic Acid on BSP expression and methylation status during osteoblastic differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) was evaluated. Materials and Methods: In this experimental study, MSCs were isolated from human bone marrow. For osteogenic differentiation,...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023